THP-1細胞(別名:THP-1(ATCC)、Tohoku Hospital Pediatrics-1等)是一種源自人急性單核細胞白血病的小鼠單核細胞系,具有典型的單核細胞/巨噬細胞特性。作為懸浮生長的腫瘤細胞,THP-1廣泛用于免疫調控、炎癥反應、吞噬功能及單核細胞分化研究,是免疫學與腫瘤學領域的基礎實驗模型。
種屬:人(Homo sapiens)
組織來源:急性單核細胞白血病;單核細胞起源
生長特性:懸浮生長,需離心收集(禁止直接傾倒培養液)
細胞形態:圓形或橢圓形單核細胞,大小均一
生物安全等級:BSL-1(常規實驗室安全操作)
培養方案
基礎培養基:RPMI-1640([PM150110])
添加物:
10% FBS([164210])
0.05 mM β-巰基乙醇(關鍵成分,維持細胞活性)
1% 雙抗(青霉素-鏈霉素,[PB180120])
無需額外成分:配方完整,直接使用
氣體環境:空氣(95%)+ CO?(5%)
溫度:37℃
推薦傳代密度:5×10? – 1×10? cells/mL
換液頻率:每2-3天更換半量培養基(懸浮細胞無需消化)
懸浮細胞操作:
傳代或換液時需低速離心(800-1000 rpm,5 min)收集細胞,禁止直接傾倒培養液。
復蘇后需靜置1-2小時,待細胞沉降后再輕柔混勻。
β-巰基乙醇必要性:該成分對THP-1活性至關重要,不可省略。
密度監控:細胞密度超過1×10? cells/mL時需及時分瓶,避免營養耗竭。
凍存與復蘇:
凍存液:無血清非程序凍存液([PB180438]),無需緩慢降溫,直接-80℃過渡后轉入液氮。
復蘇要點:快速融化(37℃水浴),離心去除凍存液后重懸。
吞噬與抗原呈遞:可吞噬乳膠顆粒、酵母聚糖及調理過的紅細胞,適用于吞噬功能研究。
分化誘導:佛波醇酯(PMA/TPA)可誘導THP-1分化為巨噬細胞樣表型,用于炎癥模型構建。
免疫調控研究:表達補體C3受體與Fc受體,適用于抗體依賴性細胞毒性(ADCC)研究。
疾病模型:模擬單核細胞在白血病、動脈粥樣硬化等疾病中的行為。
細胞起源:從1歲男性急性單核細胞白血病患兒外周血中分離建立,表面無免疫球蛋白表達。
功能驗證:XC斑點形成試驗陰性,無病毒顆粒分泌。
保藏信息:ATCC(TIB-202)、DSMZ(ACC-16)、ECACC(88081201)權-威機構保藏。
傳代步驟:
收集細胞懸液,800-1000 rpm離心5 min,棄上清。
加入新鮮培養基重懸,按1:2-1:4比例分瓶。
凍存技巧:
收集對數期細胞,離心后用預冷凍存液重懸,直接-80℃保存24小時后轉入液氮。
計數與接種:
使用血球計數板或自動細胞計數儀,維持密度在5×10? – 1×10? cells/mL。
THP-1細胞以其穩定的懸浮生長特性與明確的巨噬細胞分化潛能,成為免疫與腫瘤研究中的核心工具。嚴格遵循離心收集與β-巰基乙醇添加要求,可最大限度維持細胞功能與實驗可重復性。